New Tech компаниясынын толук автоматтык нуклеин кислотасын алуу жана аныктоочу машинасы

Беш күч:
● Аспап нуклеин кислотасын экстракциялоо жана тазаланган кадам менен конфигурацияланган
● УЗИ экстракция модулу менен конфигурацияланган аспап
● Инструмент толугу менен автоматтык түрдө конфигурацияланган
● Курал өзгөрүлмө температураны күчөтүү менен конфигурацияланган
● Курал толугу менен тиркелген реагент комплекти менен конфигурацияланган

1. Нуклеин кислотасын аныктоочу реагенттерди экстракциялоо жана тазалоо керекпи?
Нуклеиндик кислотаны аныктоо принциби төмөнкүдөй: праймердин таасири астында ДНК полимеразасы ДНК/РНК шаблонунда чынжыр реакциясын күчөтүү үчүн колдонулат (НАнын тескери транскрипциясын талап кылат), андан кийин флуоресценттик сигналдын бөлүнүп чыккан көлөмү аныкталат. үлгүдө аныктала турган козгогучтун нуклеиндик кислотасы (ДНК/РНК) бар-жокпу.

1) Чыгарылбаган же тазаланбаган үлгүлөр акыркы натыйжага таасир этүүчү көптөгөн компоненттерди камтышы мүмкүн: нуклеаза (максаттуу нуклеин кислотасын эритип, жалган терс таасирге алып келиши мүмкүн), протеаза (ДНК полимеразаны азайтып, жалган терс таасир тийгизет), оор металл туз (бул синтазанын инактивацияланышына алып келет жана жалган позитивдүү), өтө кычкыл же өтө щелочтуу РН (бул ишке ашпай калуу реакциясы), толук эмес РНК (жалган терс тескери транскрипциянын бузулушуна алып келет).

2) Кээ бир үлгүлөрдү түздөн-түз күчөтүү кыйын: Грам-оң жана кээ бир мителер, алардын клетка дубалдары жана башка структуралары калың болгондуктан, эгерде алар нуклеин кислотасын экстракциялоо жана тазалоо процессинен өтүшпөсө, экстракциясыз комплект мындайлар үчүн иштебей калышы мүмкүн. үлгүлөр.

Ошондуктан, нуклеин кислотасын экстракциялоо кадамы менен конфигурацияланган тесттик комплект же аспапты тандоо сунушталат.

2. Химиялык экстракция же физикалык УЗИ фрагментация алуу?
Жалпысынан алганда, химиялык экстракцияны алдын ала тазалоонун жана тазалоонун көбүнө колдонсо болот. Бирок, калың дубалдуу Грам-оң бактерияларда жана кээ бир мителерде химиялык экстракция эффективдүү нуклеин кислотасынын калыптарын ала албай, жалган терс аныктоого алып келет. Мындан тышкары, химиялык экстракцияда көбүнчө күчтүү агенттер колдонулат, эгерде элюция кылдат болбосо, реакция системасына күчтүү щелочту киргизүү оңой, натыйжада так эмес жыйынтыктар келип чыгат.

УЗИ фрагментация физикалык майдалоону колдонот, аны адам колдонуусу үчүн POCT чөйрөсүндөгү алдыңкы ишкана GeneXpert ийгиликтүү колдонгон жана кээ бир татаал үлгүлөрдү (мисалы, кургак учук микобактериясынын) нуклеин кислотасын алууда абсолюттук артыкчылыкка ээ.

Ошондуктан, нуклеин кислотасын экстракциялоо баскычы менен конфигурацияланган тесттик комплект же аспапты тандоо сунушталат. жана ультра үн чыгаруу модулу бар болсо, бул оптималдуу болуп саналат.

3. Кол менен , Жарым автоматтык жана толук автоматтык?
Бул эмгектин наркынын жана жумуштун натыйжалуулугунун көйгөйү. Азыркы учурда үй жаныбарлары үчүн ооруканаларда кызматкерлер жетишсиз, нуклеин кислотасын алуу жана аныктоо белгилүү бир көндүмдөрдү жана тажрыйбаны талап кылган иш. Толук автоматтык нуклеин кислотасын алуу жана аныктоочу машина эң сонун тандоо экени талашсыз.

4. Туруктуу температураны күчөтүү же өзгөрүлмө температураны күчөтүү?
Күчөтүү реакциясы нуклеиндик кислотаны аныктоочу звено болуп саналат жана бул шилтемеге тартылган кесипкөй технология татаал. Болжол менен айтканда, ферменттер нуклеин кислотасын күчөтүү үчүн колдонулат. Күчөтүү процессинде күчөтүлгөн флуоресценция сигналы же камтылган флуоресценция сигналы аныкталат. Жалпысынан алганда, флуоресценция сигналы канчалык эрте пайда болсо, үлгүдөгү максаттуу гендин мазмуну ошончолук чоң болот.

Туруктуу температураны күчөтүү - бул нуклеиндик кислотанын белгиленген температурада күчөтүлүшү, ал эми өзгөрүлмө температуранын күчөтүлүшү - денатурация-аннеалдаштыруу-узартууга ылайык циклдик күчөтүү. Туруктуу температураны күчөтүү убактысы аткарылды, ал эми өзгөрүлмө температураны күчөтүү убактысына аспаптын температурасынын көтөрүлүү жана төмөндөшүнүн ылдамдыгы чоң таасирин тийгизет (азыркы учурда көптөгөн өндүрүүчүлөр болжол менен 30 мүнөттүн ичинде күчөтүүнүн 40 циклин жасай алышкан).

Эгерде лабораториялык шарттар жакшы болсо жана райондоштуруу катуу болсо, экөөнүн ортосундагы тактык айырмасы чоң болбойт деп айтуу акылга сыярлык. Бирок, өзгөрүлмө температураны күчөтүү салыштырмалуу кыска убакыттын ичинде көбүрөөк нуклеин кислотасынын продуктуларын синтездейт. Катуу зоналаштыруу жана кесипкөй окутуу персоналы жок лабораториялар үчүн нуклеин кислотасынын аэрозолдорунун агып кетүү коркунучу жогору болот, агызып кеткенден кийин жалган позитив пайда болот жана аны жок кылуу өтө кыйын.

Кошумчалай кетсек, Туруктуу температураны күчөтүү да үлгү татаал болгондо спецификалык эмес күчөтүүгө көбүрөөк жакын болот (салыштырмалуу реакциянын температурасы төмөн, жана узартуу температурасы канчалык жогору болсо, праймердин байланыш өзгөчөлүгү ошончолук жакшы болот).

Учурдагы технологияга келсек, өзгөрүлмө температураны күчөтүү кыйла ишенимдүү.

5. Нуклеин кислотасын күчөтүү продуктуларынын агып кетүү коркунучунан кантип сактануу керек?
Азыркы учурда, көптөгөн өндүрүүчүлөр сүрүлүү менен жабылган нуклеиндик кислота реакциясынын түтүгү катары без түрүндөгү ПТР түтүгүн тандашат жана өзгөрүлмө температурадагы ПТР күчөтүүсүндө температуранын денатурациясы 90 градуска жетет.
Centigrade. Жылуулук менен кеңейүүнүн жана муздак менен жыйрылышынын кайталанган процесси ПТР түтүгүн жабуу үчүн чоң көйгөй болуп саналат, ал эми без тибиндеги ПТР түтүкчөлөрүнүн агып кетиши салыштырмалуу оңой.

Реакция продуктунун агып кетпеши үчүн реакцияны толугу менен жабылган комплект/түтүк менен кабыл алган жакшы. Нуклеин кислотасын алуу жана аныктоо үчүн толук жабык комплект иштелип чыкса эң сонун болмок.

Ошентип, New Tech компаниясынын жаңы толук автоматтык нуклеин кислотасын алуу жана аныктоочу машинасы жогорудагы беш оптималдуу тандоого ээ.